Se ubica en la iglesia del mismo nombre. Destinado a museo desde 1969.La iglesia es de una sola nave dividida en tramos. La parte más antigua corresponde a la capilla de los Alderete, que empezó a construirse a principios del XVI. El resto de la iglesia se construye en el XVI y XVII.

El museo alberga las mejores piezas procedentes de las iglesias de Tordesillas. Destacan un Cristo Yacente de la escuela de Gregorio Fernández, una Inmaculada de Pedro de Mena, un retablo con esculturas de Juan de Juni y el sepulcro de alabastro realizado en 1550 por Gaspar de Tordesillas, entre otras piezas.